(Flæðifrumusjá, FCM) er frumugreiningartæki sem mælir flúrljómunarstyrk litaðra frumumerkja. Þetta er hátæknileg tækni sem þróuð er byggð á greiningu og flokkun einstakra frumna. Það getur fljótt mælt og flokkað stærð, innri byggingu, DNA, RNA, prótein, mótefnavaka og aðra eðlis- eða efnafræðilega eiginleika frumna og getur byggt á söfnun þessara flokkana.
Flæðisfrumumælir samanstendur aðallega af eftirfarandi fimm hlutum:
1 Flæðishólf og vökvakerfi
2 Leysiljósgjafi og geislamótunarkerfi
3 Sjónkerfi
4 Rafmagns-, geymslu-, skjá- og greiningarkerfi
5 Frumuflokkunarkerfi
Meðal þeirra er leysigeislaörvun í leysigeislaljósgjafa og geislamyndunarkerfi aðal mæling á flúrljómunarmerkjum í flæðifrumusjá. Styrkur örvunarljóssins og útsetningartími tengjast styrk flúrljómunarmerkisins. Leysir er samfelld ljósgjafi sem getur veitt lýsingu með einni bylgjulengd, mikilli styrkleika og mikilli stöðugleika. Það er kjörin örvunarljósgjafi til að uppfylla þessar kröfur.
Tvær sívalningslaga linsur eru á milli leysigeislans og flæðishólfsins. Þessar linsur beina leysigeisla með hringlaga þversniði frá leysigeislanum að sporöskjulaga geisla með minni þversniði (22 μm × 66 μm). Leysigeislaorkan innan þessa sporöskjulaga geisla er dreifð samkvæmt normaldreifingu, sem tryggir samræmda lýsingarstyrkleika fyrir frumur sem fara í gegnum leysigreiningarsvæðið. Hins vegar samanstendur ljóskerfið af mörgum settum af linsum, nálargötum og síum, sem gróflega má skipta í tvo hópa: uppstreymis og niðurstreymis frá flæðishólfinu.
Ljóskerfið fyrir framan flæðishólfið samanstendur af linsu og nálarholu. Meginhlutverk linsunnar og nálarholunnar (venjulega tvær linsur og eitt nálarhol) er að einbeita leysigeislanum með hringlaga þversniði sem leysigeislinn sendir frá sér í sporöskjulaga geisla með minna þversniði. Þetta dreifir leysiorkunni samkvæmt normaldreifingu, sem tryggir samræmdan lýsingarstyrk fyrir frumur yfir leysigreiningarsvæðið og lágmarkar truflanir frá villiljósi.
Það eru þrjár megingerðir af síum:
1: Langtíðnissía (LPF) - hleypir aðeins ljósi með bylgjulengdir sem eru hærri en ákveðið gildi í gegn.
2: Skammtíðissía (SPF) - hleypir aðeins ljósi með bylgjulengdir undir ákveðnu gildi í gegn.
3: Bandpass filter (BPF) - hleypir aðeins ljósi á ákveðnu bylgjulengdarbili í gegn.
Mismunandi samsetningar sía geta beint flúrljómunarmerkjum á mismunandi bylgjulengdum að einstökum ljósmargföldunarrörum (PMT). Til dæmis eru síur til að greina græna flúrljómun (FITC) fyrir framan PMT LPF550 og BPF525. Síurnar sem notaðar eru til að greina appelsínugula-rauða flúrljómun (PE) fyrir framan PMT eru LPF600 og BPF575. Síurnar til að greina rauða flúrljómun (CY5) fyrir framan PMT eru LPF650 og BPF675.
Flæðifrumusjárgreining er aðallega notuð til frumuflokkunar. Með framþróun tölvutækni, þróun ónæmisfræði og uppfinningu einstofna mótefnatækni, eru notkun hennar í líffræði, læknisfræði, lyfjafræði og öðrum sviðum að verða sífellt útbreiddari. Þessi notkun felur í sér greiningu á frumuhreyfingum, frumudauða, frumugerð, æxlisgreiningu, greiningu á virkni lyfja o.s.frv.
Birtingartími: 21. september 2023
